Si claro,
lo haces así:
Código PHP:
$fecha1 = strtotime($row_Recordset4['hora_entrada']);
$fecha2 = strtotime($row_Recordset4['hora_salida']);
$diferencia_segundos = ($fecha2-$fecha1);
$diferencia_minutos = ($fecha2-$fecha1)/60;
$diferencia_horas = ($fecha2-$fecha1)/60/60;
Hay que tener en cuenta que el campo donde almacenas la fecha en tu base de datos está en formato date o datetime.